Minden előadások szövettan
menteni vivo állami struktúrákat;
kellően vékony és átlátszó, hogy tanulmányozza mikroszkóp alatt áteső fényben;
a kontraszt, azaz, hogy szerkezetének tanulmányozására mikroszkóp alatt egyértelműen meg kell határozni;
készítmények fénymikroszkópos fenn kell tartani sokáig, és használni az ismételt vizsgálatra.
Ezeket a követelményeket érjük a készítmény előállítására.
3. Rendelje a következő előkészítő szakaszában szövettani előkészítés
A befogó anyagot (darab szövet vagy szerv) a készítmény előállításához. Ez figyelembe veszi a következőket: egy kerítés anyag kell végezni a lehető leghamarabb halála után, vagy az állat levágását, és ha lehetséges az élő tárgy (biopszia), hogy jobban megőrizte szerkezetét a sejt, szövet vagy szerv; darab a kerítés kell tenni egy éles eszköz, hogy ne traumatize szövet; szeletvastagság nem haladhatja meg az 5 mm-, hogy a rögzítő-oldatban is behatolnak a belső tér egy darab; szükségképpen egy darab jelölés (adja nevét a szervezetben egy állat vagy egy ember számot eredetű, a mintavétel időpontja, és így tovább).
A rögzítés anyag szükséges, hogy állítsa le az anyagcsere-folyamatokat, és megőrzi a struktúrák a pusztulástól. Rögzítés érjük merítéssel gyakran darab rögzítő folyadék, amely lehet egyszerű alkoholokat és a formaldehid és a komplex Carnoy-féle oldat, és más Tsinker rögzítőt. A rögzítő okoz fehérje denaturációt, és ezáltal felfüggeszti anyagcsere-folyamatok és tárolja a szerkezet az állam életében. Fixation lehet elérni is fagyasztással (hűtés áramban CO2, folyékony nitrogén, stb). Időtartam rögzítés kiválasztott empirikusan egyes szövetek vagy szervek.
Kitöltése darab tömítő közegben (paraffinviasz, celloidin, gyanta) vagy fagyasztva későbbi előállítására vékony szeletekre.
Előállítása szakaszok speciális eszközök (mikrotomkés vagy ultramikrotóm) speciális késekkel. Metszeteket fénymikroszkóppal ragasztott üveg csúszdák, és elektronmikroszkópos - szerelt különleges háló.
Színező vagy kontrasztos szakaszok (elektronmikroszkópos). Festés előtt szakaszok eltávolítjuk tömítő közeget (viaszmentesítésével). Színkontraszt a szerkezetek nem érjük. Színezékek vannak osztva bázikus, savas és semleges. bázikus színezékek (általában hematoxilin) és savas (eozin) alkalmazzák a legszélesebb körben. Gyakran használja komplex színezékek.
Ébredés szakaszok (xilol, toluol), megállapítva a gyanta (balzsam, polisztirol), záró egy fedőlemezzel.
Ezek után az egymást követő gyógyszeres kezelések is tanulmányozható a fénymikroszkóp alatt.
Céljára elektronmikroszkópos az előkészítő szakaszában gyógyszerek néhány jellemzője, de az általános elv ugyanaz. A fő különbség abban rejlik, hogy a szövettani felkészülés fénymikroszkóppal lehet tartósan tárolni és újrahasznosítani. Metszeteket készítettünk elektronmikroszkópos csak egyszer használható. Ebben az esetben először fényképezte a fontosabb tárgyak a gyógyszer, és a tanulmány a struktúrák végzik már az elektron.
Folyékony állagúak a szövetekből (vér, csontvelő, stb) készülnek formájában készítmények kenetet üveg tárgylemezre, amely szintén rögzítettük, festettük, majd vizsgáltuk.
Tól elszakítható parenchymás szervek (máj, vese, stb) készülnek formájában készítmények test lenyomata: után törési hézag vagy szervben szervi hibahely alkalmazott tárgylemez, amelyre vannak ragasztva néhány szabad sejtek. A készítményt ezután rögzítettük, festettük és vizsgálták.
Végül, néhány, a szervek (bélfodor, Pia), vagy a laza kötőszövet készítmények készülnek nyújtás a film vagy zúzás a két üvegtáblák, és ezt követő rögzítését, festést és szakadó gyantába.
fénymikroszkópos (felbontás 0,2 mikron), a leggyakoribb típusú mikroszkóp;
UV mikroszkóp (felbontás 0,1 mikron);
Fluoreszkáló (fluoreszcein) mikroszkópia, hogy meghatározza a vegyi anyagok e struktúrák;
fáziskontraszt mikroszkópos vizsgálatával kapcsolatos struktúrák festetlen szövettani metszetek;
polarizációs mikroszkóppal, hogy tanulmányozza, főként szálas szerkezetek;
sötét látóterű mikroszkóppal a tanulmány az élőlények;
mikroszkóppal beeső fény a tanulmány a vastag tárgyak;
elektronmikroszkóppal (állásfoglalást 0,1-0,7 nm), a két variáns áttetsző (átvitel) elektronmikroszkóppal és scanning mikroszkóppal vagy raszteres térképezés ad ultraszerkezetek felületre.
Hisztokémiai és citokémiai eljárásokkal lehetővé teszi, hogy meghatározzuk a készítmény a vegyi anyagok és ezek mennyiségét, még a vizsgált struktúrák. A módszer alapja az elvégzése kémiai reakcióba az alkalmazott reagensekből és a vegyi anyagok a szubsztrátum reakcióterméket alkot (kontraszt vagy fluoreszcencia), amely ezután úgy határozzuk meg világos vagy fluoreszcens mikroszkóppal.
differenciális centrifugálással a módszer lehetővé teszi számunkra, hogy tanulmányozza az egyes organellumok vagy származó fragmentumok a sejtben. Erre a szelet vizsgálandó szervet eldörzsöljük, öntsük normál sóoldat, majd diszpergáljuk egy centrifuga különböző sebességgel (2-től 150-ik.) Ahhoz, hogy a számunkra érdekes frakciók ezután vizsgáltuk különböző módszerekkel.
interferometria módszerével tömegének meghatározására a száraz anyagok élő vagy rögzített tárgyak.
Immunomorfologichesky módszerek lehetővé teszi az előre immunreakciók végzett alapján az antigén-antitest kölcsönhatás, hogy meghatározzuk egy szubpopulációja limfociták mértékének meghatározására idegenség sejtek végezzen szövettani tipizálása a szövetek és szervek (meghatározza hisztokompatibilitási) szervátültetés.
Módszere sejttenyészet (in vitro, in vivo) a sejtek tenyésztése in vitro vagy in speciális kapszulák egy szervezetben, és későbbi vizsgálatban az élő sejteket mikroszkóp alatt.
Az egységek használt szövettani
Ahhoz, hogy mérjük a struktúrák fénymikroszkóp segítségével főleg mikrométer: 1 m értéke 0,001 mm; a elektronmikroszkópia nanométer használt 1 nm-en 0,001 mikron.
5. A történelem szövettan hagyományosan három periódusra osztható:
Domikroskopichesky idő (IV. BC. E. 1665 YG) társított nevek Arisztotelész, Galen, Avicenna Vesalius, azzal jellemezve Fallopian és izolációs kísérletek állatokban és emberekben inhomogén szöveti (kemény, lágy, folyékony, és így tovább) és eljárások alkalmazásával a boncolással.
Különös figyelmet fordítottunk a tanulmány a sejt szerkezetét. Yang Purkinje jelenléte leírt állati sejtekben „protoplazma” (citoplazma) és a sejtmagban, és a később megerősítette a jelenlétét R. Brown mag és a legtöbb állati sejtekben. Botanist M. Schleiden érdekelt kletoktsitokenezisom eredetű. Az eredmények ezen vizsgálatok lehetővé tették T. Schwann, alapján azok az üzenetek, cell elmélet megfogalmazott formájában három posztulátumok (1838-1839 gg.):
Minden növény és állat sejtekből áll;
Az összes sejtek fejlődnek az általános elvét tsitoblastemy;
minden cella önálló életfunkciók és az életfunkciókat a szervezet az összege tevékenységének sejteket.
Azonban röviddel Virchow (1858), azt mondta, hogy a fejlődés a sejtek végzik elosztjuk az eredeti sejtek (bármilyen sejt a sejt). Által tervezett T. Schwann rendelkezések cell elmélet releváns a jelen, bár megfogalmazott másképp.
A jelenlegi helyzet a sejt elmélet:
sejt a legkisebb egység az élet;
állati szervezetek sejtek hasonló szerkezetük;
sejt szaporodás történik, hogy elosztjuk az eredeti sejt;
többsejtű élőlények komplex részegységek a sejtek és származékaik egyesítjük a szövetekben és szervekben rendszerek összekapcsolt celluláris, humorális és neurális szabályozási formákat.
További javulás mikroszkópok, különösen a létrehozását akromatikus lencsék, feltárt sejtek kisebb szerkezetek:
sejt-központ Hertwig 1875..;
szita vagy lemez berendezésben Golgi komplexen 1898.;
mitokondriumok Benda 1898.
A jelenlegi fejlődési szakaszában Szövet- kezdődik 1950 eleje óta a használata a elektronmikroszkóp a tanulmány a biológiai objektumok, bár az elektronmikroszkóp feltalálója korábban (E. Ruska, M. Knoll, 1931). Azonban a jelenlegi fejlődési szakaszában jellemzi a bevezetése szövettan, nem csak az elektronmikroszkóp, hanem más módszereket: cito- és hisztokémiai, gistoradiografii fenti és más modern technikák. Ez általában használják a különböző komplex technikák lehetővé teszik, hogy ne csak a minőségi képet a vizsgált struktúrák, hanem hogy pontos mennyiségi jellemzőit. Különösen széles körben használják jelenleg különböző morfometriai módszerekkel, beleértve az automatizált információ feldolgozó rendszer használatával kapott számítógépeket.
ELŐADÁS 2. Citológia. citoplazma
1. A koncepció a citológia
2. Szerkezeti plasmolemma
3. A szerkezet a sejt-sejt kapcsolatok
4. összetétele hyaloplasm
5. osztályozása sejtszervecskék
6. A szerkezet közös organellumok
7. A szerkezet nem-membrán organellum
8. Besorolás zárványok
1. citológiai tudomány a szerkezet, a fejlesztés és a sejtek aktivitását. Ezért a sejtbiológia tanulmányozza a mintákat a strukturális és funkcionális szervezet először az (sejt) szervezettségi szintje élő anyag. A sejt a legkisebb egység az élő anyag, amely az önálló életre, és a képességét, hogy saját párhuzamos. Oktatási sejten belüli (nucleus mitokondriumok és más sejtszervecskék) annak ellenére, hogy az élőlények, de nincs önálló életet.
Elementary elemi cella egy élő, amely a citoplazma és a sejtmag és a struktúra alapján, fejlődését és működését minden állati és növényi szervezeteket.
A fő összetevői a sejt:
Arányából sejtmagban és a citoplazmában (nukleáris-citoplazma arány), a sejtek vannak osztva:
Nukleáris sejttípus túlsúlyban a hangerő a mag a citoplazma térfogatának;
sejt-citoplazmában, citoplazmatikus típusú elsőbbséget élvez a mag.
Az alakja a cella:
kerek (vörös vérsejtek);
kocka vagy henger alakú (sejtek különböző epitélium);
Process (idegsejtek) és mások.
A legtöbb sejtek tartalmaznak egy egymagos, de lehet egy sejtben 2, 3 vagy több mag sokmagvú sejtek. A szervezetben vannak struktúrák (symplasts, sintitsy) tartalmazó több tíz vagy akár több száz magok. Azonban, ezek a struktúrák képződnek, vagy az egyesülés az egyedi sejtek (symplasts) vagy miatt hiányos sejtosztódás (syncytia). A morfológiai ezeket a struktúrákat figyelembe kell venni a tanulmány a szövetekben.
Szerkezeti elemek a citoplazma állati sejtek:
Plasmolemma körülvevő citoplazma, gyakran tekintik, mint az egyik sejtszervekből a citoplazmában.
2. Szerkezet és funkció plasmolemma (tsitolemmy)
Plasmolemma állati sejt borítékot határoló belső környezet és a biztosító kölcsönhatást extracelluláris cellás környezetben.
Plasmolemma vastagsága mintegy 10 nm, és a következőkből áll 40% lipidek, 5-10% szénhidrát (részeként glycocalyx), és a 50-55% fehérjék.
receptor vagy antigén;
a kialakulását a sejt-sejt kapcsolatokat.
Az alapja szerkezete plasmolemma molekulbilipidnaya lipid kettős rétegű membránhoz, amely helyeken beépített fehérjemolekulák, is van egy réteg glikokalix nadmembranny szerkezetileg rokon fehérjék és lipidek bilipidnoy membrán, és bizonyos sejtekben van egy submembrane réteg.
A szerkezet a membrán bilipidnoy
Mindegyik monoréteg molekulája képződik elsősorban foszfolipideket és részben a koleszterin. Ugyanakkor az egyes lipid molekulában különbséget tenni a két részből áll: egy hidrofil fej és egy hidrofób farok. A hidrofób farka a lipid molekulák egymással kapcsolatban és a forma bilipidny réteget. Hidrofil fejük bilipidnogo érintkező réteg a külső vagy a belső környezet. Bilipidnaya membrán, és pontosabban annak mély hidrofób réteg elvégzi a barrier funkciója, megakadályozza a víz bejutását és oldott anyagok is, valamint a nagy molekulák és részecskék.
három réteg a külső és a belső elektronnoplotnye közbenső alacsony elektronsűrűség által meghatározott elektron diffrakcióval a plasmolemma egyértelműen.
Protein-molekula beépül a membrán réteg bilipidny helyben, és nem egy folyamatos réteget képez. Szerint a lokalizáció a membrán fehérjék vannak osztva:
Integrál bilipidnogo behatolnak a teljes réteg vastagsága;
poluintegralnye magában csak egyrétegű lipid (külső vagy belső);
membránnal szomszédos, de nem beleépítve.
Szerint a funkciója plasmolemma fehérjék vannak osztva:
Található a külső felületen plasmolemma fehérjék, lipidek és hidrofil fejek általában társított szénhidrát láncot, és a polimer molekulák komplexet képeznek glikolipidek és glikoproteinek. Éppen ezek a makromolekulák, és nadmembranny réteg - glikokalix. Az osztódó sejtekben van submembrane kialakított réteg mikrotubulusok és mikroszálak.