Szövettani kutatási módszerek
Szövettani alkalmazott kutatási módszerek tanulmányozása szerkezetének és funkciójának a sejtek és szövetek, állati és növényi organizmusok norma, patológia és a kísérlet. Az alapja a szövettani kutatási módszerek szövettani módszer - egy sor oktatási technikák előállításához felhasznált termékek a sejtek és szövetek azok mikroszkópos vizsgálat. Mikroszkópos vizsgálata során a sejtek és szövetek végezhetjük két fő módja, attól függően, hogy az állam a tárgy szerinti vizsgálat: olyan vizsgálat, az élő sejtek és szövetek, a tanulmány a nem élő sejtek és szövetek, megőrizve a szerkezet köszönhetően speciális módszerek fixálás.
A tanulmány az élőlények - vitális (supravital) - lehetővé teszi, hogy tartsa be a fiziológiai folyamatokat a sejtekben és szövetekben, élettartama épületben. Ez sejtjein végzett, szabadon felfüggesztett, a folyékony közegben (vérsejtek, epiteliális sejtek és scrapings al.), Valamint a sejt és szövettenyészetek növesztett egy speciális növekedési média. Az alany in vivo megfigyelések lehet vékony, átlátszó szövet fólia (bélfodor, Palama). A kísérleti vizsgálatok szerint az eljárás a biológiai ablakok (átlátszó implantációs kamrák) és a tanulmány a szöveti implantátumok természetes átlátszó közegben, például az elülső kamrába, a szemek az állatok. A feladattól függően a létfontosságú vizsgálatokban használt különböző speciális módszerek mikroszkópia: sötétlátóteres, fáziskontraszt, fluoreszcencia, polarizációs, ultraibolya. Vital szövettani módszerek elsősorban a biológiai és orvosbiológiai kutatások. Ezek széleskörű használatát korlátozza a nagy technikai nehézségek tulajdonságait szövetek tapasztalható. Az orvosi kutatás, különösen a gyakorlatban a post-mortem laboratóriumi kutatási módszerek rögzített tárgyakat.
Történő rögzítése céljából intravitális megőrzése sejt és szöveti szerkezete gyors kitettség kémiai szerek, amelyek megakadályozzák a poszt-mortem változásokat. A választás a rögzítési mód függ a célkitűzések a tanulmány és reteszelő jellemzői az anyag. Így, detektálására finom celluláris struktúrákat használt rögzítési tartalmazó keverékek Nehézfémek sói (például sulemu) a citológiai fixáló legjobb céljait szolgálja ozmium-tetroxidot, és gyakran használt elektronmikroszkópia. Univerzális inaktiváló alkalmazott formaldehid formájában 10% -os formalin-oldatot. Hogy rögzítse volt egyenletes és teljes darab szövet kell tartani kicsi, és az összeget a fixáló folyadék - nem haladhatja meg az összeggel, amelyet az anyag sokszor. Rögzítésével a zárólapok jellemzően mossuk vízzel vagy alkohollal. Szilárd szöveti komponensek (például kicsapás kalcium-sók) eltávolítjuk csontritkulás módszerekkel.
A leggyorsabb és legegyszerűbb módja, hogy készítsen szöveti metszeten általánosan használt, amikor a gyors diagnózis fagyasztás és kapok egy darab szövetet szakaszok fagyasztó mikrotommal. Azonban nehéz beszerezni kellően vékony metszetek és szakaszok apró tárgyak és rothadó szöveteket. Ezért darab szövet, általában öntjük tömítő közeg - paraffinnal vagy celloidin. Rögzített szöveti dehidratáljuk alkoholokban növekvő vár végzett köztes oldószerben (xilolban vagy toluolban, paraffin, alkohol-éter celloidin) és impregnált paraffinnal vagy celloidin. Töltsük paraffinba lehetővé teszi, hogy vékonyabb szeleteket (5-8 1-2 mm), mint a töltési celloidin. Metszeteket készítettünk mikroszkopikus vizsgálat szánkó vagy rotációs mikrotom. Az ultravékony metszeteket (vastagság 90-100 5-15 nm) szükséges Elektronmikroszkópos vizsgálatok ultratome előkészített. Ultratome használni fénymikroszkóppal félvékony szakaszok. Az elkészített metszeteket világos sejtek elválasztása és szöveti szerkezete különbözik észlelt színek. Bázikus színezékek - színező bázisok és sóik (metilénkék, toluidin kék, égszínkék, hematoxilin, Bismarck Brown) - megfesteni úgynevezett bazofil szerkezetek (nucleus sejtek inoglia). Savas színezékek - savas festékek és sóik (pikrinsav, eozin, eritrozin) - festettük acidofil vagy oxyphilous, szerkezete (a sejtek citoplazmájában, kollagén, rugalmas rostok). A festés meg kell különböztetni impregnáló - egy különleges módszer alapja a képesség az egyes szakaszok a sejtek és szövetek, hogy visszaszerezze a nehézfémek (például az ezüst, arany, ozmium) a sókból és ezáltal megszerezni intenzív színű.
Előállítása hisztológiai készítmény teljessé annak megkötésére a környezetben, hogy biztosítsák a biztonságos az objektum szerkezetének, a színét és az átláthatóság. A leggyakrabban erre a célra használt szerves gyanták, mint például Kanada balzsam.