2. témakör

Ott vannak a következő típusú mikroszkóppal:

1) fénymikroszkópos (a leggyakoribb típus a mikroszkópia, a felbontás a mikroszkóp 0,2 m);

2) UV mikroszkópiával (felbontása a mikroszkóp 0,1 m);

3) fluoreszcens mikroszkóppal (a vizsgálat során alkalmazott, hogy meghatározzák a hisztológiai készítmény bizonyos kémiai szerkezetek);

4) a fáziskontraszt mikroszkópos (kimutatására alkalmazott és tanulmányozása bizonyos szerkezetek nem festett szövetmintákban);

5) polarizált mikroszkópos (főleg tanulmányozására szálas szerkezetek);

6) sötét látóterű mikroszkóppal használják a tanulmány az élőlények;

7) mikroszkóppal beeső fény (tervezett tanulmány vastag objektumok);

8) Elektronikus Mikroszkóp (a legtöbb modern megjelenés mikroszkóp, amelynek felbontóképessége a 0,1-0,7 nm). Kétféle elektronmikroszkópos - áttetsző (átvitel) és szkennelés (vagy habarcs) mikroszkópia, amely a képernyő felületén ultraszerkezetek.

Szövettani és citokémiai eljárásokat alkalmazunk, hogy meghatározzuk a készítmény a vegyi anyagok és ezek mennyiségét bizonyos szerkezetek. Az elv a módszer abban áll, a kémiai reakció a reagens és a szubsztrátum tartalmazott a vizsgált anyag. Ebben a reakcióban keletkezett melléktermékeket felhasználásával is kimutatható a fény vagy fluoreszcens mikroszkóppal.

interferonometrii a módszer lehetővé teszi, hogy meghatározza a tömeg a szárazanyag élő vagy rögzített tárgyak.

sejttenyészet módszer - növekszik a sejtek kémcsövekben vagy speciális kapszulák a szervezetben, és a következő vizsgálatban az élő sejteket mikroszkóp alatt.

Vitális festési módszer - bevezetésével állatok a vérbe vagy a hasi üregébe festék (trepanovogo kék), amely, ha az állat élete által befogott bizonyos sejtek - makrofágok, de a vágás után az állat és készítmény a hatóanyag határozza meg, és megszámoltuk a sejteket tartalmazó festéket.

Immunomorfologichesky módszerek lehetővé teszik az előre immunreakciók végre (kölcsönhatásán alapul az antigén - antitest), hogy meghatározza egy szubpopulációja limfociták, fokú idegenség sejtek végezzen szövettani tipizálása a szövetek és szervek, azaz, hogy meghatározzák a hisztokompatibilitási további transzplantáció ...

differenciális centrifugálással módszer - a tanulmány az egyes organellumok vagy azok fragmensei, izoláljuk a sejtekből. Erre a célra, a vizsgálati darab eldörzsöljük test, öntsük normál sóoldat, majd diszpergáljuk egy centrifuga különböző sebességgel (2-150 ezer. 1 perc). Ennek eredményeként a centrifugálás érdekes frakciókat ezután vizsgálták különböző módszerekkel.

morfometria módszerek - kvantitatív módszerek. Ezek lehetővé teszik, hogy meghatározza a mérete és térfogata a mag - kariometriya, sejt - citometria, organellumok - elektronikus ometria, valamint hogy meghatározzák a számos különböző sejt-populációk és alcsoportokban. Ezek a módszerek széles körben használják a tudományos kutatás.

Különböző kísérleti módszereket - táplálék és víz terhelés, fizikai módszerekkel (UHF, mikrohullámú sütő, lézerek, mágnesek). Arra használatosak, hogy tanulmányozzák a reakció a szerkezet az érdeklődés a némi hatása, és egyesítjük a módszerek morfometria, cito- és hisztokémia. Ezek a módszerek is használják a kutatásban.

Így a fő és legelterjedtebb módszer a tanulmány a szövettani mikroszkópos. Előállítása hisztológiai készítmény magában foglalja a következő lépéseket.

- egy darab szövet vagy szerv. Ha a kerítés anyag szükséges betartani az alábbi szabályokat:

1) a kerítés anyag kell végezni a lehető leghamarabb halála után, vagy az állat levágását, ha lehet, az élő tárgy hogyan lehet a legjobban megőrizni a szerkezet sejtek lehet vizsgálni;

2) a kerítés anyagot kell végezni egy éles eszközzel, hogy ne traumatize szöveti;

3) vastagsága szeletek nem haladhatja meg az 5 mm-, hogy a rögzítő-oldatban képes behatolni a teljes mélysége a szövet;

4) meg kell győződnie arról, hogy a jelölés darab, a megadott néven a test állatok számának vagy a személy nevét, a mintavétel időpontja.

Ezt a lépést végre annak érdekében, hogy állítsa le az anyagcsere folyamatokat a sejtekben, és tartsa a széthullás. Ehhez, hogy átvegye a tanulmány darab szövet merítjük fixáló oldatban. Az oldat lehet egyszerű (alkohol vagy formalin) és komplex (Carnoy-féle oldat Tsinker rögzítőt). A rögzítő okozza fehérjék denaturálása és megőrzi sejt szerkezete egy állam közel egy életen át. Fixation végezhetjük által is fagyasztás - hűtött folyékony nitrogén vagy szén-dioxid áramot.

Kitöltése darab ruhával a tömítő közeg

(Paraffin gyanta) -, vagy fagyasztás. Ez a lépés szükséges ahhoz, hogy a későbbiekben ki a szövet gyártható vékony rész.

Előállítása szeleteket egy mikrotómon vagy ultramikrotóm speciális kések

A metszeteket fénymikroszkóppal ragasztott üveg csúszdák, és az e - szerelt különleges háló.

Színezés szeletek vagy elhomályosodásához

(Az elektronmikroszkópos). Festés előtt a szelet az eltávolítani kívánt tömítő környezet - elvégezni deparafirovanie. A színek kontrasztja struktúrák érhető el. Színezékek oszthatók bázikus, savas és semleges. bázikus színezékek (hematoxilin) ​​és savas (eozin) használják a legszélesebb körben. A gyakran használt és komplex színezékek.

Felvilágosodás szakaszok xilolt és toluolt

Ezek zárt gyantát (Balsam és polisztirol) és fedőlemezt.

Miután ezeket az eljárásokat, a gyógyszer lehet vizsgálni fénymikroszkóp alatt. Alá az üveg szakaszok fénymikroszkópos is hosszú tárolható és újra felhasználhatók. Mind a szakaszok elektronmikroszkópos használunk csak 1 alkalommal, miközben a fényképezett, és a tanulmány a szöveti struktúrák által termelt elektron diffrakcióval.

Ha az anyag egy folyékony konzisztenciájú (például vér, csontvelő), akkor a hatóanyag van kiszerelve, mint a kenet tárgylemezre, amelyet azután szintén rögzítettük, festettük, és vizsgálták.

Tól elszakítható parenchymás szervek készült formájában szerv készítmények kinyomtatott hajtjuk törés a szerv, majd felvisszük a helyén a hiba diát, amelyen sejtek tapadnak a rendelkezésre álló. Ezt követően, a gyógyszer rögzített és megvizsgálták.

Egyes szervek (például a mesenterialis Pial) vagy a laza kötőszövet készítmények készülnek nyújtás a film vagy ezek préselt két üveglap közé, majd rögzítése és öntés a gyantát.